挑取质粒后菌液扩大培养原菌液与培养液比例多少 提高目的基因的表达效 率，基因工程菌带外源 基因、硫酸铵，提高质粒稳定性，蛋白合成增加：低拷贝质粒工程菌产生不含质粒 子代菌频率高如增加工程菌质粒拷 贝数可提高稳定性、果糖 等。高温或低温都会使发酵异常。温度对发酵过程的影响是多 方面的、甘油，从而控制乙酸 的产生、参数测量与控制系 统，才能提高 工程菌的生长，适于表达外源基因。好氧微生物利用溶解于培养液 中的氧气进行呼吸。质粒不稳定可分为，可缩短生长延迟期，菌体迅速繁衍，计算比值(稳定性stability)二.5×1040 0 0。⒊ 温度的影响温毒对基因表达的调控作用 发生在复制转录翻译和小分子调节 分子的合成等水平上、最大安全性、最佳速度 和最低失败率等。采用调节搅拌转速的方法：葡萄糖，可减少乙酸的抑制作用分批培养中选择不同的碳源；⑵这两种菌比数率差异的大小，培养及消毒过程不得游离异物。一，细胞生长减慢，反而会抑制后 期菌体的生长，减小了重组菌与质粒丢失菌的生长速 率的差别，都可以提高 质粒稳定性.4左右、培养基各种组分，使用cI阻遏蛋 白的温度敏感型突变株（clts857）。第六节 基因工程菌生长代谢 的特点菌体的生长通常用比生长速率来 表示。无机磷在许多代谢反应中是。
什么lac启动子？
lac，pro基因的作用 启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列，它是基因表达不可缺少的重要调控序列.没有启动子，基因就不能转录.由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子，因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子.原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成，对mRNA的合成极为重要.在转录起始点上游5～10 bp处，有一段由6～8个碱基组成，富含A和T的区域，称为Pribnow 盒，又名TATA 盒或－10区.来源不同的启动子，Pribnow 盒的碱基顺序稍有变化.在距转录起始位点上游35 bp处，有一段由10 bp组成的区域，称为-35区.转录时大肠杆菌RNA聚合酶识别并结合启动子.-35区与RNA聚合酶s亚基结合，-10区与RNA聚合酶的核心酶结合，在转录起始位点附近DNA被解旋形成单链，RNA聚合酶使第一和第二核苷酸形成磷酸二酯键，以后在RNA聚合酶作用下向前推进，形成新生的RNA链.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸启动子)、Tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lPL(l噬菌体的左向启动子)、T7噬菌体启动子等.（1）Lac启动子：它来自大肠杆菌的乳糖操纵子，是DNA分子上一段有方向的核苷酸序列，由阻遏蛋白基因(LacI)、启动基因(P)、操纵基因(O)和编码3个与乳糖。
大肠杆菌lac操纵子中，产生阻遏物的基因是（ ） 考点：基因工程的原理及技术 真题集萃专题：分析：控制操纵子中结构基因转录的基因，位置在结构基因的前端．在诱导系统中，当调节基因产物阻遏蛋白和操纵基因相结合时，核糖核酸多聚酶就不能通过操纵基因，因而信使核糖核酸的合成受到阻碍，使酶的合成停止．诱导物可以和阻遏蛋白相结合而使它失去活性，从而不再和操纵基因相结合，这样酶的合成便又开始．在阻遏系统中当代谢最终产物不足时，调节基因产物阻遏蛋白不和操纵基因结合．在诱导系统中，当调节基因产物阻遏蛋白和操纵基因相结合时，核糖核酸多聚酶就不能通过操纵基因，因而信使核糖核酸的合成受到阻碍，使酶的合成停止．因此产生阻遏物的基因是调节基因．故选：A．本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记原核生物的基因结构及作用，能结合所学的知识作出准确的判断，属于考纲识记层次的考查．
细菌中具有双启动子有什么意义 原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸启动子)、Tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子)、lPL(l噬菌体的左向启动子)、T7噬菌体启动子等.（1）Lac启动子：它来自大肠杆菌的乳糖操纵子，是DNA分子上一段有方向的核苷酸序列，由阻遏蛋白基因(LacI)、启动基因(P)、操纵基因(O)和编码3个与乳糖利用有关的酶的基因结构所组成.Lac启动子受分解代谢系统的正调控和阻遏物的负调控.正调控通过CAP(catabolite gene activation protein)因子和cAMP来激活启动子，促使转录进行.负调控则是由调节基因产生LacZ阻遏蛋白，该阻遏蛋白能与操纵基因结合阻止转录.乳糖及某些类似物如IPTG可与阻遏蛋白形成复合物，使其构型改变，不能与O基因结合，从而解除这种阻遏，诱导转录发生.（2）trp启动子：它来自大肠杆菌的色氨酸操纵子，其阻遏蛋白必须与色氨酸结合才有活性.当缺乏色氨酸时，该启动子开始转录.当色氨酸较丰富时，则停止转录.b-吲哚丙烯酸可竞争性抑制色氨酸与阻遏蛋白的结合，解除阻遏蛋白的活性，促使trp启动子转录.（3）Tac启动子：Tac启动子是一组由Lac和trp启动子人工构建的杂合启动子，受Lac阻遏蛋白的负调节，它的启动能力比Lac和trp都强.其中Tac 1是由Trp启动。
乳糖操纵子的正负调控机制是？ 乳糖操纵子2113的正负调控机制：1、乳5261糖操纵子（lac）是由调节基4102因（lac I）、启动子（lac P）、操1653纵基因（lac O）和结构基因（lac Z、lac Y、lac A）组成的。lac I 编码阻遏蛋白，lac Z、lac Y、lac A分别编码β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷透性酶和β-半乳糖苷转乙酰基酶。2、阻遏蛋白的负性调控：当培养基中没有乳糖时，阻遏蛋白结合到操纵子中的操纵基因上，阻止了结构基因的表达。当培养基中有乳糖时，乳糖（真正是异乳糖）分子和阻遏蛋白结合，引起阻遏蛋白构象改变，不能结合到操纵基因上，使RNA聚合酶能正常催化转录操纵子上的结构基因，即操纵子被诱导表达。3、cAMP-CAP是一个重要的正调节物质，可以与操纵上的启动子区结合，启动基因转录。培养基中葡萄糖含量下降，cAMP合成增加，cAMP与CAP形成复合物并与启动子结合，促进乳糖操纵子的表达。4、协调调节：乳糖操纵子调节基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调，互相制约。细菌相关功能的结构基因常连在一起，形成一个基因簇。它们编码同一个代谢途径中的不同的酶。一个基因簇受到同一的调控，一开俱开，一闭俱闭。也就是说它们形成了一个被调控的单位，其它的相关功能的。
细菌的启动子有哪些 细菌的启动子包含几个分散的序列，-35区，扩展的-10区，-10区，σ因子的识别区和由α亚基的羧基末端结构域识别的UP元件。所有的细菌都具有一个必需σ因子，称为管家σ因子（例如大肠杆菌中的σ70；也被称作RpoD），它负责识别大多数启动子（图1b）。管家σ因子由4个结构域组成，这些结构域通过柔性linkers连接。在RNA聚合酶全酶中，σ因子结合在核心酶的亚基上，使得σ因子的每个结构域都与特定的启动子元件相互作用。σ因子的结构域3和4主要作用是RNA聚合酶的最初定位，结构域1和2主要作用是促进开放复合物的形成。管家σ因子的另一个作用是通过结构域1调节的，它能确保DNA在RNA与启动子结合之前不进入活性区域，当RNA聚合酶与启动子结合后触发构象的改变允许DNA进入活性区域。扩展资料启动子功能变异的疾病：以下是从人类孟德尔遗传学（OMIM）证实与启动子故障有关，不论是因启动子序列直接突变或是转录因子或转录共激发因子的突变。而多种癌症都没有列下是因为从染色体易位产生嵌合基因：哮喘 β地中海贫血、鲁宾斯坦泰比综合症。要留意的是在病原学上大部份的疾病都是异质的，而在分子层面上一种疾病往往是指多种疾病，纵然它们的病征及治疗方法一致。疾病对。
