TE溶液中EDTA 和 Tris-CI 可以同时配成1L吗？，TE 是现配现用还是可以低温保存的？保存温度是多少 分子生物学实验的基础分子生物学实验的基础知识2006-11-17 16：31<；br>；分子生物学的发展，核酸和蛋白质的结构，功能和生命的本质，核酸，蛋白质分子水平上的发病率，诊断。
蛋白质提取问题 蛋白质提取方法-列举10种方法一、植物组织蛋白质提取方法(summer)1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入)，准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4 小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜，样品制备完成。蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl(PH8)45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone)6g这种方法针对SDS-PAGE，垂直板电泳！二、植物组织蛋白质提取方法(summer)三氯醋酸—丙酮沉淀法1、在液氮中研磨叶片2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心(4℃8000rpm以上1小时)弃上清。3、加入等体积的冰浴丙酮(含0.07%的β-巯基乙醇)，摇匀后离心(4℃8000rpm以上1 小时)，然后真空干燥沉淀，备用。4、上样前加入裂解液，室温放置30 分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心(15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准)，可临时保存在4℃待用。5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。药品：提取液：含10%TCA 和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮裂解液：2.7g 尿素0.2gCHAPS 溶于3ml 灭菌。
EMS(甲基磺酸乙酯)如何使用？如何做好安全防护？ EMS？诱变？常用浓度0.05-0.5mol/L，作用时间5-60min。小心点，那东西剧毒且致癌。人工化学诱变技术：化学诱变技术是指利用一些化学物质提高生物的自然突变率，这些化学物质就叫做“化学诱变剂”。其特点有：可操作性强，简单易行；特异性较强，能诱变定位到DNA上的某些碱基；后代较易稳定遗传，一般到F3代就可稳定；应用于遗传标记，是细胞融合技术的基础。诱变剂主要包括5类，他们的特点、机理和应用如下：1、烷化剂：能使一些碱基烷基化，比如使鸟苷酸甲基化，影响mRNA的转录，从而使蛋白质的表达紊乱，使得蛋白质重组，而改变了性状。临床上应用此类物质作为抗癌药物，具有强烈杀伤癌细胞的作用，所以在应用在于植物上时，也要注意他的强烈杀伤性。主要有：甲基磺酸乙酯（EMS），是最常用的诱变剂，我们曾用作真菌的遗传标记，诱变率很高。常用浓度0.05-0.5mol/L，作用时间5-60min。该物质具有强烈致癌性和挥发性，可用5%硫代硫酸钠作为终止剂和解毒剂。SIGMA公司价格：80元/25ml。硫酸二乙酯（DMS），也很常用，但由于毒性太强，目前很少使用，作用机理和使用方法和EMS基本相同。属于剧毒品，受公安局管治。乙烯亚胺，生产的较少，很难买到。只要用于大量诱变。
EMS(甲基磺酸乙酯)如何使用？如何做好安全防护？ EMS？诱变？常用浓度0.05-0.5mol/L，作用时间5-60min。小心点，那东西剧毒且致癌。人工化学诱变技术：化学诱变技术是指利用一些化学物质提高生物的自然突变率，这些化学物质。
内参抗体和标签抗体有哪些 内参抗体（Internal Control Antibody）是对内参蛋白进行检测，以校正蛋白定量过程中的实验误差以及验证转膜、显色等步骤是否正常！常用的内参包含 GAPDH、β-actin和 β-tubulin；及线粒体内参 COX IV和核内参 Histone H3和 PCNA等内参抗体：Beta-Actin mAb(1C7)细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01010 小鼠源单克隆Beta-Actin mAb(1C7)，HRP 细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01015 小鼠源单克隆，HRP偶联GAPDH mAb(2B5)细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01020 小鼠源单克隆GAPDH mAb(2B5)，HRP 细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01025 小鼠源单克隆，HRP偶联Beta-Tubuline mAb(3G6)细胞总蛋白 55 kD Abbkine A01030 小鼠源单克隆Plant Actin mAb(3T3)植物细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01050 小鼠源单克隆PCNA mAb(1D7)细胞核蛋白 28 kD Abbkine A01040 小鼠源单克隆COX IV mAb(14Y2)细胞线粒体总蛋白 16 kD Abbkine A01060 小鼠源单克隆Histone H3 mAb(2D10)细胞核蛋白 18 kD Abbkine A01070 小鼠源单克隆标签抗体（Tag Antibody）可用于检测各种商品化表达载体上的标签序列（如：Myc、Flag、His、GST、HA等），籍以分析目的蛋白的表达含量及其功能；标签抗体：Anti-Biotin 。
