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蛋白电泳胶跑得不好最近跑蛋白质的胶,跑了十分钟左右电压为100V出现了条带融合的情况,也就是上样缓冲液看起来全部都混在一起了,连成了一条线,但是线不平~这样属于正常的么?还是胶出现问题还是怎样? 蛋白电泳跑成拱桥形

2020-07-19知识13

我是初学者,跑出来的蛋白电泳图,那些一排一排的条带是什么意思,还有一列一列的 你的胶是考染的吗?首先你得先知道一点蛋白质的基本理论知识(不会不知道吧?难道你是学医的?或者说蛋白质(包括其他分子,如DNA、RNA等)电泳的原理(或者说是分离原理).只说蛋白质:蛋白质在正常情况下,一般带有负电荷,因由不同的蛋白分子因为性质(空间结构以及基团性质)不同而带电量不同,这样结合蛋白质分子本身的不同质量,会在电场下(即电泳中)产生不同的移动速度,进而将不同的蛋白分离开.又为了消除蛋白质分子间性质的差别,创造一个单一因素的电泳分离条件,所以在进行蛋白质电泳之前,都会对蛋白质进行变性处理(非变性胶等不在此列),使蛋白质肽链打开:SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构.而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂.在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白-SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异.如此,蛋白质(准确的说应该是变形后的蛋白质或者是蛋白-SDS胶束)便会在电场中根据不同的带电量-亦即分子量而分成不同的条带.每一条带代表着。蛋白印记电泳时恒压和恒流跑胶有什么区别 1.两者基本没有区别,对于15-75kda的蛋白来说是这样子的2.不明白的话建议看看《蛋白质技术手册》这本书,主编;汪家政,范明蛋白电泳图跑成这样,能用吗蛋白跑的是上窄下宽,而且往两边偏是为何啊,不知道这图能不能用来发文章 跑蛋白电泳时转膜液可以重复用多少次 我个人认为是可以重复的,四次左右可以保证质量,但再多了就不好说了.关键是甲醇容易挥发,如果发现甲醇那股味道没有了就必须要换了

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