酶的选用原则是什？限制性内切酶酶切鉴定重组质粒，酶的选用原则是什么：一般可选取连接时用的酶，经酶切后，加入连接时用的切过的载体和片段作对照，就可比较是否为阳性的。
限制性内切酶用量可按标准体系DNA加1单位酶，但要完全酶解则必须增加酶的用量，一般增 参考答案：B
限制性内切酶有几类？各有什么特点 根据限制2113酶的结构，辅因子的需求切位与作用5261方式，可将限制4102酶分为三种类型，分别是第一型（1653Type I）、第二型（Type Ⅱ）及第三型（Type Ⅲ）。第一型限制酶同时具有修饰（modification）及识别切割（restriction）的作用；另有识别（recognize)DNA上特定碱基序列的能力，通常其切割位（cleavage site）距离识别位（recognition site）可达数千个碱基之远。例如：EcoB、EcoK。第二型限制酶只具有识别切割的作用，修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回文序列（palindrome sequence）；所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上，实用性较高的限制酶种类。例如：EcoRI、HindⅢ。第三型限制酶与第一型限制酶类似，同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列，切割位与识别序列约距24-26个碱基对。例如：HinfⅢ。扩展资料限制性内切酶分类性质根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子，限制性内切酶可分为两大类，即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大；反应过程中除需Mg2+外，还需要S-腺苷-L甲硫氨酸、ATP；在DNA分子上没有特异性的酶解片断，这是I、Ⅱ类酶之间最明显的。
在XhoⅠ和XbaⅠ限制性内切酶双酶切体系中，反应体系是什么？或者这两种酶在体系中的比例是多少？请指教！ 反应体系应该指的是，两种酶同时使用时，应该用的buffer系统，且每一种酶的用量，DNA的用量，以及保证酶量不超过总反应体积的1/10，即20ul体系中，两个酶的总量不能超过2ul。你可以在内切酶公司网站上查到推荐的反应体系：从图上看，这两个酶在不能再另一个酶的推荐buffer中使用，只能用2X Tango buffer进行双酶切，而从酶活性上来看，XbaI在2X Tango中，活性50-100%，而XhoI则是100%，所以如果两个酶要调整用量的话，XbaI需要是XhoI用量的2倍，但就是酶总量不能超过总体积的10%。
