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紫外分光光度法 操作要点

2020-07-16知识7
紫外分光光度法含量测定操作方法有哪些? 1.对照品比较法 按各该品种项下规定的方法,分别配制供试品溶液,对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100%±10%以内,用同一溶剂,在规定的波长... 紫外-可见分光光度法的使用方法 《中华人民共和国药典》2005年版 第一部 附录VA(P附录28):(1)波长 由于环境因素对机械部分的影响,仪器的波长经常会略有变动,因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外,还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm,或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正,钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用,但因来源不同或随着时间的推移会有微小的差别,使用时应注意。(2)吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml,在规定的波长处测定并计算其吸收系数,并与规定的吸收系数比较,应符合表中的规定。波长/nm235(最小)257(最大)313(最小)350(最大)吸收系数的规定值 124.5 144.0 48.62 106.6 吸收系数的许可范围 123.0~126.0 142.8~146.2 47.0~50.3 105.5~108.5(3)杂散光的检查可按下页表的试剂和浓度,配制成水溶液,置1cm... 紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同:(1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。(2)可见分光光度计采用低杂散光,高分辨率的单光束单色器,保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰,所以可用紫外分光... 紫外分光光度法 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>原发布者:记忆_染成画紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)1定义:它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用,对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。2分类:按所吸收光的波长区域不同:分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外-可见分光光度法。3、紫外-可见分光光度法的特点:(1)其仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快;(与其它光谱分析方法相比)(2)灵敏度高;(3)选择性好;(4)精密度和准确度较高;(5)用途广泛。1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的,利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性,这就是光谱法的基础。通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。2.有机化合物的紫外-可见吸收光谱2.1有机化合物的电子跃迁与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种,即... 求紫外分光光度计的校正步骤 校正吸光度常用一很纯物质 一定浓度的溶液为标准,且此溶液的吸光度系数经不同实验室核对,为了使标准液吸光度不受测定波长的微移动而有改变,常选择具有较平滑吸收高峰的物质。同时要求溶液稳定,且在相当的波长范围内吸收度的改变符合Beer-Lambert定律,常用硫酸铜、硫酸铵钻和硝酸钠或钾的溶液。铬酸钾溶液是最常用的标准溶液,此溶液在紫外区和可见区均适用。校正波长或波数可用具有窄吸收带的溶液,滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。如果要求很高的精密度时,可用放电灯泡发射的射线来校正。有的光谱仪其上已装有一个为校正用的灯。苯的蒸气对校正一定范围的波长亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,测其吸收波长,在远紫外区可用氧气的吸收带进行校正。用各种稀土金属的滤光片,可以很快地校正波长,但准确度不如上述方法高。常用含有钬和钕、镨离子的滤光片。扩展资料:日常维护一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀,使金属镜面的光洁度下降,引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀,产生光能不足、杂散光、噪声等,甚至仪器停止工作,从而影响仪器寿命。... 紫外分光光度法的详细步骤 dfwf 紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光度法的2113特点5261 1、与其它光谱分析方法相比,紫外可见4102分光光度法事物仪1653器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。二、紫外可见分光光度法的适用范围紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面,在许多领域更是必备的分析方法,例如食品等行业中的产品质量控制。扩展资料紫外可见分光光度法的注意点: 1、准备操作仪器前,需要先查看一下指针仪器在断电的情况下,表面指针是否指向零刻度。如若不是,理应先调零然后才能连接电源。2、在使用的过程中,操作员应该尽量避免对镜灯的触碰,放大器使用过后,一定需要把档位归置到零。3、在操作紫外可见分光光度计时,操作人员需要留意一下机器的干燥剂。4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。参考资料来源:百度百科-紫外-可见分光光度法 急求紫外分光光度法的详细操作步骤 一、原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择性吸收的特性而建立分光光度法或称吸收光谱法的分析方法。它是以朗伯─比耳定律为基础。1 朗伯—比耳定律 A=lg—-=ECL T 式中 A为吸收度;T为透光率;E为吸收系数,采用的表示方法是(E1%1cm),其物理意义为当溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。二、使用范围凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。三、仪器可见-紫外分光光度计。其应用波长范围为200~400nm的紫外光区、400~850nm的可见光区。主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。本仪器是根据相对测量的原理工作的,即先选定某一溶剂(或空气、试样)作为标准(空白或称参比)溶液,并认为它的透光率为100%(或吸收度为0),而被测的试样透光率(或吸收度)是相对于标准溶液而言,实际上就是由出射狭缝射出的单色光,... 10、紫外分光光度法操作注意事项 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>原发布者:dongbinbin33 紫外分光光度法操作注意事项注意事项uu1.玻璃仪器的校准1.玻璃仪器的校准试验中所用的量瓶,移液管均应经检定/校准、洗净后使用.定/校准、洗净后使用2注意事项uuu2.吸收池2.吸收池使用的石英吸收池必须洁净。用于盛装样品、参比及空白溶液的。取吸收池时,手指拿毛玻璃面的两侧。装盛样品溶液以池体积的4/5为度,使用挥发性溶液时应溶液以池体积的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无残留溶剂,为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面,可先用蘸有空白溶剂的擦镜纸擦拭,然后再用干擦镜纸拭净。3注意事项uu2.吸收池2.吸收池吸收池吸收池放入样品室时应注意每次放入方向相同。使用后用溶剂及水冲洗干净,晾干防尘保存,吸收使用后用溶剂及水冲洗干净,晾干防尘保存,吸收池如污染不易洗净时,可用硫酸发烟硝e69da5e887aa7a686964616f31333433623830酸(3池如污染不易洗净时,可用硫酸发烟硝酸(33:1V1V/VV)混合液稍加浸泡后,洗净备用。如用铬酸钾清洁液清洗时,吸收他不宜在清洁液中长时间浸泡,否则清洁液中的铬酸钾结晶会损液中长时间浸泡,否则清洁液中的... 紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光度法的特点1、与其它光谱分析方法相比,紫外可见分光光度法事物仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、...

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