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如图是将目的基因导入动物细胞,培育转基因动物的常用操作程序.根据图示过程和所学知识,将下面操作程序

2020-09-30知识6

目的基因导入动物细胞的方法是什么?

如图是将目的基因导入动物细胞,培育转基因动物的常用操作程序.根据图示过程和所学知识,将下面操作程序

将目的基因导入动物细胞的方法是 C

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目的基因导入动物细胞的方法是什么? 目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。导入的介质可以是质粒,也可以是动物病毒侵染。显微注射法是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接。

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目的基因导入动物细胞的方法是什么? 目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。导入的介质可以是质粒,也可以是动物病毒侵染。显微注射法是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组、缺失、复制或易位等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。扩展资料显微注射法转基因的方式直接把重组过的DNA注入受精卵的原核中,也就是将从胚胎提供者的输卵管中取得的受精卵移到倒置显微镜上的微量注射台上,然后利用固定吸量管固定住,之后注射针则依序穿过zonapellucida,ocytemembrane及malepronuleusmembrane后,将DNA注入,注入时可以见到原核膨大。以小鼠受精卵雄原核的显微注射为例,显微注射所使用的受精卵固定吸管(holdingpipette)及注射针制备很困难,除影响操作时间外,也是影响转基因效率及基因注入后之胚胎存活及转基因成功与否极其重要的因子。参考资料来源:-显微注射法

如图是将目的基因导入动物细胞,培育转基因动物的常用操作程序.根据图示过程和所学知识,将下面操作程序 (1)在构建基因表达载体时,常用的DNA连接酶有E?coliDNA连接酶(大肠杆菌DNA连接酶)、T4-DNA连接酶,二者均可以连接粘性末端,其中T4-DNA连接酶还可以连接平末端;如果目的基因要在乳腺细胞中表达,需将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子结合,基因表达载体上还需标记基因和终止子等组件,载体一般要有一至多个限制酶切割位点便于插入目的基因.(2)为了获得足够数量的受精卵,常用促性腺激素处理供体雌鼠,使其超数排卵,从输卵管中冲取卵子(卵母细胞),再完成体外受精即可.(3)确定目的基因是否整合到染色体上,一般需用放射性同位素标记(荧光分子标记)的目的基因(单链),与转基因小鼠细胞中提取的基因组DNA(核DNA),进行DNA分子杂交,通过是否产生杂交链来检测.(4)早期胚胎培养的培养液成分,除无机盐和有机盐外,还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,并需添加动物血清等天然成分.(5)在胚胎移植前,为了使胚胎移植前后处于相同的生理状态,要对接受胚胎的受体进行同期发情处理;移植后,要对受体雌鼠进行是否妊娠检查.(6)胚胎干细胞具有体积小,细胞核大,核仁明显等特点,添加抑制分化的因子可以只分裂不分化.故答案为。

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