脂肪酶活力测定 建议:鱼肝胰脏脂肪酶的活性检测到底采用何种底物,不好说,从理论上讲应该是都可以的,中国水产科学研究院黑龙江水产研究所叶继丹采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法测定鲟鱼。
什么是酶活力测定的终点法?此法有何优缺点? 酶活力测定常用的方法有终点法和动力学方法两类。终点法测定完成一定量反应所需的时间,如α-淀粉酶的活力测定。因为碘对淀粉呈现蓝色反应,当淀粉溶液中加入淀粉酶后,碘的蓝色反应消失而呈现红棕色;碘对淀粉颜色反应消失的时间可表示淀粉酶活力的大小。碘对淀粉颜色反应消失花的时间越短,表示酶的活力越高。动力学方法测定一定时间内所起的化学反应量。①比色法 如果酶反应的产物可与特定的化学试剂反应而生成稳定的有色溶液,且生成颜色的深浅与产物的浓度在一定的范围内有线性关系可用此法。如蛋白酶的活力测定:蛋白酶可水解酪蛋白,产生的酪氨酸可与福林试剂反应生成稳定的蓝色化合物,在一定的浓度范围内,所生成蓝色化合物颜色的深浅与酪氨酸的量之间有线性关系,可用于定量测定。②量气法 主要用于有气体产生的酶促反应。如氨基酸脱羧酶、脲酶的活力测定。产生的二氧化碳量可用特制的仪器如瓦氏呼吸仪测定之。根据气体变化和时间的关系,即可求得酶反应的速度。③滴定法 如果产物之一是自由的酸性物质可用此法。如脂肪酶催化脂肪水解,脂肪酸的增加量代表脂肪酶的活力。④分光光度法 利用底物和产物光吸收性质的不同,可直接测定反应混合物中底物的减少。
脂肪酶活力的测定方法 先附上米氏方程:v=V[s]/(Km+[s])下面那个作图法就是取这个方程两边倒数得到的。很容易算。1、在反应中测出不同底物浓度时的知反应速度,以道反应速度倒数为纵轴,以底物浓度倒数为横轴作图,得一条直线,为米氏方程推出的“双倒数作图法”。2、很容易得出结论,直线斜率为Km/V,横截距为-1/Km,纵截回距为1/V。其中V是最大反应速度,Km是米氏常数,指酶反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度,它就反映了酶的活力,即与底物分子的亲和力。此即测定方法。答适用于任何酶,包括楼主说的脂肪酶。
脂肪酶活力的测定实验步骤? 答:可以考虑采用 橄 榄 油乳化液法测定脂肪酶的活力,具体步骤如下:取100 ml,三角瓶4个,每瓶加人5 mL磷酸缓冲液(pH=7.5,0.02 5mol/1)和4m l,聚乙烯醇橄榄油乳化液,。
测定脂肪酶活力时一定要用橄榄油吗 测定脂肪酶活力时一定要用橄榄油。脂肪酶酶活力检测标准 GB-T 23535-2009标准规定使用橄榄油(分析纯);底物溶液:按4%聚乙烯醇:橄榄油=3:1比例混合,用高速匀浆机处理6min(分两次处理,间隔5min,每次处理3min)。pH7.5磷酸缓冲液:称取十二水磷酸氢二钠39.62g,磷酸二氢钾1.96g,用水溶解并定容至500mL,调节溶液的pH到7.5±0.05。脂肪酶是一种特殊的酯键水解酶,它可作用于甘油三酯的酯键,使甘油三酯降解为甘油二酯、单甘油酯、甘油和脂肪酸。酶是一种活性蛋白质。因此,一切对蛋白质活性有影响的因素都影响酶的活性。酶与底物作用的活性,受温度、pH值、酶液浓度、底物浓度、酶的激活剂或抑制剂等许多因素的影响。脂肪酶在微生物中有广泛的分布,其产生菌主要是霉菌和细菌。已经公布的适用于甘油三酯加工的不同来源的脂肪酶有33种,其中18种来自霉菌,7种来自细菌。脂肪酶可将甘油酯(油、脂)水解,在不同阶段可释放出脂肪酸、甘油二酯、甘油单酯及甘油。水解生成的脂肪酸,可以用标准的碱溶液滴定,以滴定值表示酶活力。反应式为:RCOOH+NaOH→RCOONa+H2O
什么叫酶的活力和比活力?测定酶活力应注意什么 酶活力(enzyme activity)也称为酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可用在一定条件下,酶催化某一化学反应的速度来表示,酶催化反应速度愈大,酶活力愈。
脂肪酶活力测定 脂肪酶是一种特殊的水解酶,在轻工、化工、医药、食品等行业有广泛的用途。近年来,随着非水酶学和界面酶学的不断深入,脂肪酶应用也不断地扩展,被广泛应用于酯合成、手性。
脂肪酶活力测定 脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子,如蓖麻籽、油菜籽,当油料种子发芽时,脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质。
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