考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量的优缺点？ Bradford法的突出优点是：（1）灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg.这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多.（2）测定快速、简便，只需加一种试剂.完成一个样品的测定，只需要5分钟左右.由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好.因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间.（3）干扰物质少.如干扰Lowry法的K、Na、Mg2 离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法.此法的缺点是：（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作 标准曲线时通常选用 g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差.（2）仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0.1N的NaOH.（如同0.1N的酸干扰Lowary法一样）.（3）标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用Beer定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度.
考马斯亮蓝法测定蛋白质的公式是什么？？？ 公式是根据测量结果自己算出来的：考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立 的1种测定微量蛋白质的方法L5]，考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力，通过疏水作用与蛋白质相结合，形成的蓝色蛋白质一染料复合物，在595 nm处有最大吸光度，复合物1 h内保持稳定。在一定的蛋白质浓度范围内，蛋白质一染料复合物在595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质含量的测定。测定时，用同一种标准蛋白（自己选，如牛血清白蛋白，所选的标准蛋白最好是纯化的待测蛋白—但这是理想状态，一般选择氨基酸构成与待测蛋白相近的标准蛋白。否则将影响测定结果）配制成覆盖待测样品蛋白浓度的标准蛋白溶液，然后加等量考马斯亮蓝G-250，混匀后用紫外分光光度计测定个标准蛋白样品的吸光值。并测定待测样品（可稀释成几个不同浓度的样品同时测）的吸光值。所有样品重复测三次。最后以蛋白标准溶液浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。计算出回归方程。如Y=aX+b让后把待测样品的吸光值代入回归方程，算出待测样品浓度。只要上数据库一搜，这样的论文多的是，要加强自学能力呀！赚点分真辛苦！
各种常见的蛋白质定量测定方法的优缺点 低浓度的盐，例如生化制备中常用的（nh4）2so4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对。
考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量的优缺点？ Bradford法的突出优点是：（1）灵敏度2113高，据估计5261比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可4102达1mg。这是1653因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质－染料复合物有更高的消光系数，因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。（2）测定快速、简便，只需加一种试剂。完成一个样品的测定，只需要5分钟左右。由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好。因而完全不用像Lowry法那样费时和严格地控制时间。（3）干扰物质少。如干扰Lowry法的K、Na、Mg2 离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。此法的缺点是：（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作 标准曲线时通常选用 g—球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。（2）仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0.1N的NaOH。（如同0.1N的酸干扰Lowary法一样）。（3）标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用Beer定律进行计算，而只能用。
蛋白纯化加甘油 his标签蛋白纯化加甘油的作用是什么？要是加甘油比例是多少？目的蛋白复性杂带会减弱吗？有什么方法可以减少杂带而不会去除目的蛋白呢？。
如何测定蛋白浓度 一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：nh2ch2cooh+3h2so4—2co2+3so2+4h2o+nh3(1)2nh3+h2so4—(nh4)2so4(2)(nh4)2so4+2naoh—2h2o+na2so4+2nh3(3)反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。计算所得结果为样品总氮量，如欲求得 样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。二、双缩脲法（biuret法）（一）实验原理双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量。
有哪些因素可干扰Folin-酚测定蛋白质含量？ 酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用.浓度较低的尿素（0.5%），硫酸纳（1%），硝酸纳（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）等溶液对显色无影响，但这些物质浓度.
蛋白质的起泡性和稳定性实验中蔗糖和甘油的加入量为多少 起泡性是食物蛋白质的一种重要知功能性质，它 影响许多糖食制品的质量。评价蛋白质的起泡性一般用二个指标道来衡量：一是发泡力；二是泡沫稳定性。测定发泡力的方法通常是在一定浓度的蛋白质溶内液中通入空气或用高速搅打法充气，测量其所形成的泡沫体积或容比重。而稳定性往往是测量泡沫在一定时间内的液体析出率。
