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胶原蛋白的提取分离 用双水相萃取发分离碱性蛋白酶

2020-09-27知识5

胶原蛋白的提取分离 由于胶原是细胞外间质成分,在体内以不溶性大分子结构存在,并与蛋白多糖、糖蛋白等结合在一起,因此胶原的制备包括材料的选择、预处理、酸碱酶盐水法。

酶分离纯化过程中需要注意什么问题?为什么进行酶活力、酶比活力的测定 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:a995853256ppt制作:朱杰明ppt讲解:尹聪翔资料查找:陈荣威目酶的分离与纯化酶在分离纯化中应注意的问题酶活力录酶比活力酶活回收率酶比活力提高比酶的提取、分离纯化技术路线细胞破碎动物、植物或微生物细胞酶提取酶分离纯化酶浓缩酶贮存离心分离,过滤分离,沉淀分离,层析分离,电泳分离,萃取分离,结晶分离等。根据酶提取时,所采用的溶剂或溶液的不同,酶抽提的方法主要有盐溶液提取,酸溶液提取,碱溶液提取,有机溶剂提取等。1.盐溶液提取:大多数酶在一定浓度的盐存在条件下,酶的溶解度增加,即盐溶,但盐浓度不能太高,否则溶解度反而降低,即盐析。故:一般采用稀盐溶液进行酶的提取,盐浓度控制在0.020.5mol/L。如淀粉酶、蛋白酶等胞外酶0.14mol/l氯化钠溶液提取。2.酸溶液提取:有些酶在酸性条件下溶解度比较大,且稳定性好,宜用酸溶液提取。提取时需注意溶液的pH不能太低,以免酶变性失活。如胰蛋白酶可用0.12mol/l硫酸溶液提取。3.碱性溶液提取:有些酶在碱性条件下溶解度较大,且稳定性较好,宜用碱溶液提取,操作时注意pH不能过高,以免影响酶活,同时加碱液时要一边搅拌一边缓慢加进,避免局部过碱而。

蛋白质分离纯化的四种方法 1、盐析法:盐析法的2113根据是蛋白质在5261稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上4102升,但当盐1653浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱水作用;其二、有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。3、蛋白质沉淀剂:蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。4、聚乙二醇沉淀作用:聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。扩展资料:蛋白质是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%~20%,即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。人体内蛋白质的种类很多,性质、功能各异,但都是由20多种氨基酸(Amino acid)按不同比例组合而成的。

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