PH大于等电点，氨基酸带什么电荷？
溶菌酶等电点 关于酶的纯化上，蛋清中溶菌酶的等电点在pH10.8 左右，在偏酸性和偏碱性溶液中，其稳定性都比较好，蛋清中其他蛋白杂质的等电点约在pH4.6～5.0 左右，适量酸的添加既不会破坏。
有四种蛋白质溶液，其大小和等电点分别是54kD和4，48kD和7，100kD和4，75kD和10 ，请设计实验 （1）100kD蛋白的纯化可以分为两步：离子交换和分子筛。因为48kD和75kD的蛋白等电点与目的蛋白相差很大，所以在相同的buffer条件下，前两者带点性质与目的蛋白相差很大，通过离子交换的方法可以将三者分开。具体来说可以选用pH5.5左右的buffer，用Q柱纯化。54kD的蛋白和100kD的蛋白电荷性质类似，通过离子交换层析可能分不开，但二者分子量有近两倍的差距，适用于分子筛，所以第二步选用合适的分子筛利用二者分子量的大小分开即可。（2）6M盐酸胍处理之后除了肽键和二硫键无法打开之外，蛋白完全变性。这种条件下测得的分子量是25kD，加入beta-ME之后二硫键被还原打开，测得分子量为10kD和15kD，说明这二者是通过二硫键相连的，所以结构为一个10kD和一个15kD的亚基通过分子间二硫键的作用连成二聚体。也有可能是异源四聚体，异源六聚体，异源八聚体等等。因为第一步测定的分子量是在盐酸胍条件下，多聚体之间如果没有二硫键连接也会被解聚。如下图：
为什么PH值大于等电点就为负电荷 蛋白质或两性电解质所带净电荷为零时溶液的pH，它们在电场中的迁移率为零。当外界溶液的pH大于两性离子的等电点，两性离子释放质子带负电。当外界溶液的pH小于两性离子的等电点，两性离子质子化带正电。
为什么PH值大于等电点时带负电荷 ，小于等电点时带正电？ 当蛋白质溶液的pH等于q等电点时，蛋白质不g带电荷。当ph大u于f等电点时，也g就是说溶液中6带了q较多的OH-，蛋白质吸附某些OH-，也d就带上n了p负电 2011-10-30 0：06：33
等电点与最适pH有什么关系？ 等电点会影响一定pH值下的溶解度。两性分子在水或盐水中在其等抄电点的溶解度最低，一般会在等电点时从溶液里沉淀出来。生物两性分子如蛋白质即含有酸性的，也含有碱性的官能团。组成蛋白质的氨基酸可能是带正电荷的、带负电荷的、中性的或者本生是两性的。它们的电荷加在一起是蛋白质的电荷。pH值小百于等电点时蛋白质的总电荷是正的，大于等电点时是负的。因此使用等电聚焦的技术可以在聚丙度烯酰胺凝胶里根据蛋白质不同的等电点把它们分离开来。等电聚焦也是双向凝胶电泳的第一步。(一)计算使用该分子的酸度系数可以计算一个只带一个胺基和一个羧基的氨基酸的等电点。
两种蛋白质的等电点为5.6和8.5，如何分离？ 等电点差异明显，理论上可以轻易分离.可以尝试pH6.0/6.5/7.0，选用阳离子层析.
蛋白质水解产物阳离子交换柱层析时的洗脱顺序？ pl是等电点吧，那么你就要看了，阳离子交换柱首先交换下来的是阴离子，吸附的是阳离子，这样的话，在PH6的时候，pl2.77的氨基酸是最先被洗脱的，接下来是最难洗脱的时pl10.76的，因为它此时负电性强，被阳离子吸附的最牢.关键看等电点
等电点为5的猪血清采用什么离子交换柱 等电点（pI，isoelectric point）例如：在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，所带净电荷为零，呈电中性，此时溶液的pH称为该氨基酸的等电点。两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变，当两性离子正负电荷数值相等时，溶液的pH值即其等电点。当外界溶液的pH大于两性离子的pI值，两性离子释放质子带负电。当外界溶液的pH小于两性离子的pI值，两性离子质子化带正电。当达到等电点时氨基酸在溶液中的溶解度最小。
DEAE纤维素柱的原理 DEAE纤维素柱原理，基于离子交换层析：离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。阴离子交换基质结合，带有负电荷的蛋白质，然后这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。扩展资料：基本信息：性状：干燥纤维状。用途：用于柱色谱分析，用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等，阴离子交换填料。保存：常温干燥封袋保存。DEAE—纤维素的使用方法：称取IgDEAE32或52，放入5ml量筒中，加蒸馏水浸泡过夜，观察溶胀后DEAE的体积。根据所需层析柱的柱床体积计算所需DEAE的用量，称取所需DEAE用蒸馏水浸泡过夜，其间换几次水，每次除去细小颗粒。抽干，改用0.5mol/LNaOH溶液浸泡1h以上，抽干（可用布氏漏斗），用无离子水漂洗，使pH至8左右（用pH试纸检查）。再改用0.5mol/LHCl溶液浸泡1h以上，去酸溶液，用无离子水洗至pH6左右。本实验中在用前应以0.0175mol/L，pH6.7磷酸盐缓冲液，浸泡平衡后使用。参考资料来源：-DEAE纤维素
