基因工程研究中需要哪几类酶,这些酶各有什么作用? 碱性蛋白酶内切外切

2020-09-27知识19

真菌细胞壁由几丁质、纤维素、葡聚糖、甘露聚糖等多糖、蛋白质和类脂构成，木霉菌可以产生大量这类物质的降解酶类，直接破坏植物病原真菌的细胞壁，导致细胞死亡。所有关于溶壁酶调控和表达的研究都是在不同碳源（如几丁质、葡聚糖、GlcNAc、真菌细胞壁）条件下的液体培养基中进行的，在此条件下，诱导物能够诱导木霉产生水解真菌细胞壁的溶壁酶。与生防相关的真菌细胞壁降解酶主要有几丁质酶、纤维素酶、葡聚糖酶、蛋白酶等。12.2.2.1 几丁质酶几丁质酶在木霉重寄生病原菌过程中发挥重要的作用。Inbar等（1995）研究T.harzianum特异性几丁质酶在其寄生白绢病菌过程中的活性。首先，T.harzianum的102kDa 1，4-β-N-乙酰葡聚糖胺酶（CHIT102）被诱导，随着作用时间的推移，诱导量逐渐下降，随后长约73kDa的1，4-β-N-乙酰葡聚糖胺酶（CHIT73）诱导量逐渐上升。但白绢病菌在与T.harzianum共同培养前经过高压灭菌时，这种现象就不会出现，这说明引起这种现象的重要因素来自宿主。Hoell等（2005）研究指出，几丁质酶 CHIT30 是从T.atroviride P1发酵液中分离纯化得到的，属于糖苷水解酶18 家族，最适 pH 为4.5～5.0，在降解β-几丁质时，能产生大量的三聚体和四聚体，N-。