紫外_可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;2113T为透光率;E为吸收系数,采用的表5261示方法是(4102E1%1cm),其物理意义为当1653溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;L为液层厚度,cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质,主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收,而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。
紫外可见分光光度法测量试液中元素含量时,吸光度值的最佳范围应该是6.紫外光波长范围是 《中华人民共和国药典》2005年版 第一部 附录VA(P附录28):(1)波长 由于环境因素对机械部分的影响,仪器的波长经常会略有变动,因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外,还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm,或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正,钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用,但因来源不同或随着时间的推移会有微小的差别,使用时应注意。(2)吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml,在规定的波长处测定并计算其吸收系数,并与规定的吸收系数比较,应符合表中的规定。波长/nm235(最小)257(最大)313(最小)350(最大)吸收系数的规定值 124.5 144.0 48.62 106.6 吸收系数的许可范围 123.0~126.0 142.8~146.2 47.0~50.3 105.5~108.5(3)杂散光的检查可按下页表的试剂和浓度,配制成水溶液,置1cm。
紫外可见分光光度计能测哪些指标 每种物质就有2113其特有的、固定的吸收光谱曲线,可5261根据4102吸收光谱上的某些特征波长处的吸1653光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。因此可以适用这个原理、并在紫外可见光分光光度计光谱检测范围的物质都可以使用紫外可见光分光光度计。常见的有以下几种:药物分析:《国家药典》可用紫外可见光分光光度法检测的药品,适用于药品检验、药物分析、制药等行业。生命科学:DNA、蛋白质的浓度。农牧渔:农药残留检测、作物成分检测、兽药检测、饲料检测、化肥检测、土壤成分检测、水产养殖检测等。地质勘探:矿石中金属元素和无机盐的测定。食品安全:添加剂、防腐剂、香料、脂肪、酶、糖类、香料、矿物质、维生素等的含量。环境监测:水质、大气、降雨及土壤等的监测,测定其中各类污染物的含量。
求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量
紫外-可见分光光度法测定
紫外分光光度法测定药物含量的方法主要有哪两种 紫外-可见分光光度法:是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长。
紫外可见分光光度法测核酸含量的误差来源是什么?如何排除 误差可能是由于蛋白质污染或者是其他试剂残留所引起的.A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0.A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子.纯样品,A320一般是0.
如何利用紫外可见分光光度法对药品含量进行测定 对于已经上药典或取得生产批件,有质量标准的项目,直接按照药品质量标准规定的实验方法测定即可。对于处在研究过程,还没有质量标准的新药,应首先建立含量测定的分析方法。
紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量?
如何利用紫外可见分光光度法对药品含量进行测定 对于已经上药百典或取得生产批件,有质量标准的项目,直接按照药品质量标准规定的实验方法测定即可。对于处在研究过程,还没度有质量标准的新药,应首先建立含量测定的分析方法问,进行严格的方法学验证后即可以测定。方法学验证的工作包括:测定波长选择、样品的稳定性、灵敏度研究答、专属性研究、线性范围研究、准确度研究、精密度研究和耐受性回研究等,这些工作完成后,证明方法的可行性后,就可以测定药品的含量了。答如果是生物样品,还要考虑样品的前处理方法。