抗酸染色问题讨论 如何用PCR技术检测结核杆菌

如何用PCR技术检测结核杆菌 结核2113杆菌可以导致全身性疾病，特别是在发展中国家，其5261发病率较4102高，危害性极大.近几年结核杆1653菌的变异性较大，对抗痨药物的耐药性增加，从而使结核病的发病大幅度增高.虽然传统的涂片抗酸染色、细菌培养以及胸片检查对大部分结核能作出正确的诊断，但对某些病人亦可造成误诊或漏诊；动物接种虽特异性较高，但因时间较长，不能满足临床快速诊断的需要.近几年也出现了几种快速诊断方法，但也存在较大的缺陷，如短期培养后抗原免疫原性分析，即用放免方法或酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BACTEC培养瓶中被培养标本所分泌的抗原，该方法可在BACTEC瓶本身鉴定出细菌之前，结合ELISA和涂片抗酸染色有效地鉴别典型和非典型分枝杆菌，敏感性较高，但存在培养时间长，重复性尚差的缺点.另一种是短期培养后核酸探针杂交法，即用特异性DNA探针与BACTEC瓶中培养的细菌染色体DNA杂交.该方法能有效地防止培养的假阴性结果，但却易发生假阳性结果，加之采用的方法较为复杂和繁琐，又有涉及同位素操作之嫌等，因而近来已较少应用.上面两种方法都要借助细菌培养来进行，虽然在时间上比传统培养大大缩短，但缺乏快速诊断的优势.近几年兴起的PCR方法基本实现了快速、灵敏、。试述革兰染色法的步骤，结果及其临床意义 一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定.2）草酸铵结晶紫染1分钟.3）自来水冲洗.4）加碘液覆盖涂面染约1分钟.5）水洗，用吸水纸吸去水分.6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分.7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗.干燥，镜检.具体试验 流程1、取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）.涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂.2、涂片：液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀.3、晾干：让涂片在空气中自然干燥.4、固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）.5、染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min.6、水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干.简单染色结束可观察细胞形态.7、媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗.8、脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗.9。问答题，抗酸染色的操作步骤与结果判断。 共1 抗酸染色的原理： 分枝杆菌 的细胞壁内含有大量的 脂质，主要是分枝菌酸，它包围在 肽聚糖 的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使。胸水能做抗酸染色吗 可以的。目的：探讨对血性胸水进行不同前期处理，比较抗酸性杆菌阳性率的差异。方法：132例血性胸水，同时用离心沉淀直接涂片和使用溶血剂破坏血性胸水的红细胞、降低胸水蛋白质含量后涂片，进行抗酸染色。结果：直接离心涂片共查出5份抗酸染色阳性标本，加溶血剂后查出13份抗酸染色阳性标本。结论：血性胸水经过加溶血剂处理，可提高抗酸染色阳性检出率，操作简便、快速、价廉，是基层医院的一种有效方法。明天我要到防疫中心做痰检，那的医生让我晚。 明天我要到防疫中心做痰检，那的医生让我晚上吐一口痰，然，

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