高效液相色谱仪的使用和原理分析 高效液相色谱仪(HPLC)是分析实验室常用的测试仪器之一，其应用越来越广泛。此种仪器在使用过程中，难免会出现各种各样的问题，并将直接影响到所测数据的准确性和仪器的正常工作。操作者如果能了解故障的成因，即可清楚预防和排除这些故障的方法，就可正确地使用仪器并最大限度地发挥仪器的性能。今天我们要从以下几个方面和您分享下在使用高效液相色谱仪中需注意的几个问题。一、使用试管的问题1、试管的洁净问题。高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方法，如果因使用不洁净的试管，便会影响试验结果的准确性。例如，在用甲醇作溶剂来溶解样品时，所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的，因此，在每次进样时，都有一个保留时间固定的干扰峰存在，后经证实，此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所产生，换用玻璃试管后，干扰峰消除。2、塑料试管的溶解问题。近年来，一次性塑料试管给试验人员带来了极大的方便，但是，在使用过程中一定要注意有机溶剂对试管的溶解现象，在利用此种试管提取样品时，有些有机溶剂(如氯仿等)对管壁有溶解现象，这些被溶解下来的物质有时也能在检测器上产生信号，从而干扰样品的测定。这时，可用相同的实验条件先行试验一下，看看不含。
高效液相色谱(HPLC)系统适用性试验是指哪些内容？进行该试验的目的是什么？ 一、在高效液相色谱法系统适用性试验中，有常用的四个内容：分离度、柱效、重复性和拖尾因子。1、分离度（resolution，R）—相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。2、柱效：色谱柱是色谱仪最重要的部件（心脏）。柱子内径一般为1～6 mm。常用的标准柱型是内径为4.6 或3.9mm，长度为15～30cm 的直形不锈钢柱。填料颗粒度5～10μm，柱效以理论塔板数计大约 7000～10000。减小填料粒度和柱径以提高柱效。3、拖尾因子（tailing factor，T），用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子或不对称因子。二、目的：按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。扩展资料高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \\ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。LLPC与GPC有相似之处，即分离的顺序取决于K，K大的组分保留值大；但也有不同之处，GPC中，流动相对K影响不大，LLPC流动相对K影响较大。参考资料来源：-高效液相色谱。
液相进样时一般样品的浓度范围是多少 没有确切的浓度，由2113多种因素共同决定。5261最低进样浓度一般是以最小检测限或定量限4102而定的，目的为检测含量1653的方法需要测定定量限，目的为杂质检查的项目需要测定检测限，这个限度浓度即为有效的最小进样浓度。最高浓度一般是以测定限度浓度的120%~200%来验证，比如含量测定时样品浓度确定为1mg/ml，则最高浓度可验证到1.2mg/ml；再比如有关物质测定杂质A对照溶液浓度为1μg/ml，则最高浓度可验证到2μg/ml。液相色谱进样最高/最低浓度与以下因素有关：1，检测器检测能力。紫外，蒸发光，示差，荧光等检测器的检测能力各不相同。其中，紫外检测器的灵敏度，光源的能量，流通池的通透性和洁净程度等均会决定紫外检测器的检测能力。2，物质的响应值。不同物质在同一检测器下被检测出来的信号大小各有不同，同样是1mg/ml的浓度，A物质与B物质的响应值可能会相差出2倍、10倍甚至100倍之多。3，紫外检测波长。相同物质在不同紫外波长下的响应值是不同的，这与物质在该波长下的吸收值有关。4，色谱柱。有时物质浓度过高超过色谱柱承载范围，会导致该物质形成“平头峰”或峰分叉、出现肩峰、对称性差等分离问题，影响最高浓度。有的色谱柱会对物质产生吸附，量。
