紫外光吸收法测定蛋白质浓度时，为什么要同时测定280nm及260nm的吸光度 紫外吸收检测2113DNA浓度与纯度2007年11月13日5261 星期二 11：40目的：了解紫外吸收检测DNA浓度与纯4102度的原理，掌握测定方法.原理：1653 核酸的最大吸收波长为260nm，蛋白质为280nm，在波长260nm时，1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml，单链 寡核苷酸的含量为30μg/ml，可以据此来计算核酸样品的浓度，还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值（OD260/OD280），估计核酸的纯度.纯净DNA的比值为1.8，RNA为2.0.若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除 尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低.270nm存在高吸收表明有酚的干扰.紫外分光光度法只能用于测定浓度 大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法.试剂与仪器：提取的质粒DNA，紫外分光光度仪.操作步骤：1)分光光度计先用水在260nm和280nm两个波长下校零.2)取质粒DNA样品2μl，用水稀释100倍，转入分光光度计的石英比色杯中.3)在260nm和280nm分别读出样品光密度值.如果样品浓度单位为μg/μl，则样品DNA浓度为OD 值的10倍，即如 OD260=0.1，则样品浓度即为1μg/μl.4)若OD260/OD280大于1.8，说明仍有RNA，可以考虑用RNA酶处理样品，若小于1.8，说 明样品中含有蛋白质或酚，应再用酚/氯仿抽提，以乙醇沉淀纯化。
紫外分光光度计测定蛋白质含量，紫外分光光度计在调校好对应的波长后，可以测定待测定定的蛋白质的浓度等等。
紫外分光光度法测量蛋白质的含量的原理？ 1紫外吸收光谱是基于物质的生色团和助色团的特性对紫外光谱的吸收，可用于物质的鉴定和结构分析.2参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统，在紫外光区（2.
紫外分光光度法测定蛋白质含量的方法有何优缺点受哪些因素的影响和限制 紫外分光光度2113法测定蛋白5261质含量的方法有何优缺点？受哪些因素的影4102响和限制？答：1653优点是：方法简单、灵敏、快速、高选择性，且稳定性好，不消耗样品，低浓度的盐类不干扰测定。缺点是：仪器昂贵，而且不同的蛋白质的紫外吸收是不相同的，测定结果存在着一定的误差，受光源、溶液的PH值、比色皿材质、缓冲介质溶液等因素的影响和限制。
紫外分光光度法测量蛋白质的含量的原理？ 1紫外吸收光谱是基于物质的生色团和助色团的特性对紫外光谱的吸收，可用于物质的鉴定和结构分析.2参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统，在紫外光区（220-300nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（？max）分别为279、278、和259nm。由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基，因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。因此可以用标准曲线法在280nm测样品吸光度，求得蛋白含量。
如何将紫外分光光度计测量结果转换成蛋白质浓度？ 你先配一已知浓度的牛血清白蛋白作为对照，测其吸光度，然后比对一下就行了
如何将紫外分光光度计测量结果转换成蛋白质浓度？ 利用分光光度计测定蛋白浓度需要先进行蛋白浓度标准曲线绘制.就是测量一系列已知浓度蛋白的吸光值，然后以蛋白浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制一条直线，然后将你所测样品的吸光值比对该直线所得横坐标即为样品的蛋白质浓度
求 怎样用紫外分光光度法测蛋白质含量 1、280nm的光吸收法 用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法 。
如何将紫外分光光度计测量结果转换成蛋白质浓度？
